A-1007-实验室进行活体动物操作或临时过夜饲养管理规范

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1. 目的

按照学校实验室管理处、各院系和实验动物中心对活体实验动物的生物安全监督管理要求,规范从实验动物中心拿出的活体动物到PI实验室或教学实验室(以下简称实验室)操作或临时过夜(超过24小时)饲养,制定本管理规范。

2. 编制依据

  • 《清华大学实验动物管理实施细则》
  • 《清华大学实验室标准操作规程-教学实验室生物废弃物处理》

3. 适用范围

所有经清华大学实验动物中心IACUC审批通过的《清华大学实验动物研究计划》(Animal Protocol,以下简称AP)涵盖的实验动物。

4. 职责

如实验需要从实验动物中心拿出实验动物至实验室操作或临时过夜饲养,申请者须在AP申请中充分阐述必要性、避免产生生物安全风险的可行性,经IACUC审批通过后才可实施。

未经IACUC审批通过,私自将活体动物带回实验室操作或临时过夜饲养属违规行为,一切相关责任由申请者及所在实验室PI承担。

5. AP申请及批准流程

在AP模板“活体动物出入动物设施需求”项填写必要性说明和避免生物安全风险的可行性条件分析,经IACUC批准后才可以实施。

5.1. 关于必要性说明

必要性的前提是由于实验动物中心现有条件无法满足的,又是必须急于开展的动物相关研究项目。需要说明活体动物在实验室操作或临时过夜饲养进行测试的必要性原因及时长。如动物行为学特殊训练与分析实验,使用其他平台仪器设备测试,如脑与智能实验室MRI,受动物中心空间限制、手术或仪器设备无法带入屏障内实施实验等情况。

可以包括如下内容:

(一)说明将活体动物带出动物中心的理由、必要性?

(二)活体动物在PI实验室操作时长?是否需要临时过夜饲养(如需要请说明理由和必要性)?

5.2. 活体动物带进带出的风险分析

1、 活体动物带出的风险因素进行分析

2、 风险控制和防护的措施

3、 突发情况的处理方案

5.3. 可行性条件分析

1、实验开展地点及相关仪器设备

(1)说明动物带至的楼宇及房间号

(2)是否有独立手术空间,如细胞房、通风橱或生物安全柜等

(3)实验区域是否可以保持整洁,易于消毒

以上请提供照片备注文字说明

2、动物实验临时饲养区域条件

□保证动物有清洁的饮水和自由饮食

□保证动物笼盒内垫料清洁干燥,定期更换

□保证房间温度维持在20~26℃,湿度维持在30%~70%

□保证房间通风良好,每小时换气次数可达到10~15次,没有明显异味散出

□照明周期一般维持在12h光照和12h黑暗(实验特殊参数除外),光照强度维持在130~325lx(笼盒水平)

□保证维持笼盒内的环境丰富度(巢屋、纸筒、PVC管等),同时笼盒内不能过于拥挤

□其他条件补充:

3、职业健康安全防护

(1)实验操作过程中实验者应穿戴手套、口罩、洁净的实验服,做好职业健康安全防护。(2)实验产生的废弃物如何妥善处置?如何减少动物对他人和环境的影响?

(3)生物安全事件应急预案?实验室危险源的管理和控制?

4、动物带进带出期间的管理

(1)是否设有防止动物逃逸的措施,如挡鼠板、粘鼠板等?

(2)是否安排了人员定时对动物进行巡查和看护 ?

5、动物实验开展前后,实验环境的清洁和消毒:

(1)采取什么措施减少动物毛发、排泄物或脏垫料等过敏源的暴露?

(2)如何避免脏垫料等废弃物滋生细菌、螨虫等污染实验室环境?

(3)相关用品的清洁及更新频次是?是否有卫生记录表?

6、说明手术或测试的时长、频率及规范操作

(1)手术器械是否采用121℃,20min灭菌,或消毒液浸泡,冲洗干净后再使用?

(2)手术器械是否做到了不交叉使用?

(3)手术中如何避免动物感染风险,维护动物福利?

(4)术后动物的护理方案

7、实验室相关制度及记录的落实

□《动物进出登记表》

□《环境消杀制度》

□《生物安全与保障动物福利相关制度》

□《打扫卫生记录表》

□《无菌操作规范》

□其他制度及记录

以上请提供照片

8. 以下内容,请认真阅读后履行:

1) 本人承诺以上填写内容属实,知晓活体动物带出的风险控制和防护措施,及突发情况应急处理;

2) 活体动物带出动物中心设施前会自觉打印“出门条”,并在约定时间内送回指定位置,承诺不违规过夜饲养动物;

3) 遵守中心及学校相关规章、制度要求,维护动物福利。若发生动物逃逸会及时抓捕,并告知实验动物中心和楼宇物业;

4) 承诺严格按照申请描述操作,发现初次违规承诺立即整改,针对多次的连续违规,IACUC可终止相关AP的动物使用资格,并且实验者需自行承担暂停动物实验活动带来的损失;

5) 因违规而不能开具动物福利伦理证明,需自行承担后果;

6) 如实验过程发生变更,承诺重新申请AP,否则出现AP之外的操作而导致的安全事故,实验者需承担相应责任。

6. 院系生物安全管理建议

实验动物中心定期向院系反馈相关实验室动物带出情况,根据反馈,建议院系加强相关实验室生物安全管理,定期检查相关实验室生物安全落实情况。

7. 取出动物流程

7.1. 开展存活实验操作流程

7.1.1. 屏障内登记领取灭菌后一次性打包盒打包动物;

7.1.2. 动物打包盒统一由中心工作人员灭菌,请勿自行传入;

7.1.3. 动物打包拿出屏障后,需打印出门条。在“出门条”打印系统内勾选返回物为“活体”,活体动物应于打印出门条后24小时内送回动物房指定饲养间;

7.1.4. 实验室环境消杀:动物实验前后对操作区进行擦拭和消毒。建议在生物安全柜或超净工作台内操作;

7.1.5. 动物包装盒表面消毒后打开,取出动物后及时关闭盒盖,以避免或减少盒内被污染。

7.2. 开展非存活实验操作流程

7.2.1. 将IVC笼盒带出屏障,在屏障外区指定位置打包动物,打包运输盒一次性使用,避免多次重复使用,操作过程避免动物逃逸;

7.2.2. 在“出门条”打印系统内勾选返回物为“动物尸体”。

8. 送回流程

8.1. 活体动物送回:

操作完的动物要按洁净要求打包,并于约定时限内从实验室送回实验动物中心,打包盒经传递窗表面喷消毒剂及紫外照射后,将小鼠转移至IVC笼盒,放入可拿进拿出的指定房间的笼架上。打包盒带出屏障,交由工作人员处理。“出门条”打印系统上刷卡,提交“活体”送回记录。超过24 h未送回,将收到邮件提醒。

8.2. 动物尸体送回:

应于24 h内安乐死动物,动物尸体放入自封袋并存放到-20 ℃冰箱,尽早将动物尸体送回动物中心尸体保存冰柜。“出门条”打印系统上刷卡,提交“尸体”送回记录。

9. 实验动物中心防疫管理要求

9.1. 中心指定的可带出带进的动物返回饲养间:一期(西北门西侧)111、206、208、215和二期(生物医学馆U4)U4-032房间。严禁私自转入其他房间。ABSL-2级实验动物严禁带出。

9.2. 对只有单次带进带出的动物进行预防性杀灭螨虫等体外寄生虫处理,在笼卡上标记处理日期。

9.3. 对反复多次带进带出的动物,间隔1个月用药一次。

9.4. 人兽共患传染病监测:通过抽检方式,定期对拿进拿出动物采集样本监测国标必检人兽共患传染病病原项目。一旦发现人兽共患传染病,立即停止所有实验,处理动物,上报学院、学校实验室管理处和北京市实验动物管理办公室。

10. 违规处罚措施

10.1. 如发现违规操作带进带出动物的行为,实验动物中心有权暂停相关实验、暂停门禁卡接受再培训等处罚措施。

10.2. 定期或随机对拿回动物的实验室进行巡检,如发现实验室动物操作区域脏乱差,动物操作违反动物福利要求,将提出书面整改意见发给相应实验人员及实验室PI,并报所在院系。对拒不整改,情节严重的上报学校实验室管理处依规处理。

10.3. 活体动物带出超过24小时未送回为违规行为,违规累积2次报给学院及学校实验室管理处,实验动物中心有权暂停违规实验室申请项目或发表文章开具实验动物伦理审查证明。