免疫缺陷小鼠饲养标准操作规程

针对免疫缺陷小鼠制订了专门的饲养管理，包括裸鼠、NSG等，

1. 目的

为了让免疫缺陷小鼠饲养管理更加规范，减少饲养过程中可能的污染，特制定此标准操作规程。

2. 适用范围

适用于二期（生物医学馆地下U4）北区4023房间（NCG/NSG等）免疫缺陷小鼠的饲养操作。其他常见的免疫缺陷性小鼠，如SCID小鼠、NOD-SCID小鼠等同样适用。

3. 内容

3.1. 饲养

3.1.1. 饲料：

采用辐照或高压灭菌的饲料，开袋后的饲料放入指定的饲料储存盒内密封保存，建议每周更换新的饲料储存盒。

3.1.2. 饮水：

推荐使用自动饮水，如必须使用饮水瓶饲养的，灌装好的饮水瓶在饲养间少量储存，每周换新，储存时应尽可能密封或者加盖水瓶框盖子。

3.1.3. 换笼台换笼：

使用换笼台进行换笼操作，做好不同笼动物之间的消毒工作。

3.1.4. 更换洁净拖鞋：

进入免疫缺陷动物饲养房间应更换洁净拖鞋。

3.1.5. 常规清洁消毒：

饲养间内桌面、地面每天进行两次日常清洁消毒。其它包括实验间、走廊、更衣室、缓冲间等每周一次清洁消毒，应使用含有效氯400～700 mg/L的消毒液进行地面、墙面、天花板，桌面、房门、笼架、笼具及其他设备外表面等的消毒。

3.2. 人员要求

3.2.1. 固定饲养人员进行免疫缺陷动物的饲喂，不交叉处理其他房间内动物。

3.2.2. 若实验人员同时进行不同实验项目，则应保证先操作NCG/NSG等免疫缺陷小鼠后，再操作裸鼠等其他品系，操作过正常小鼠后需间隔24小时后方可再操作免疫缺陷小鼠。

3.3. 仪器设备、实验器材及耗材的消毒

3.3.1. IVC主机用过氧化氢熏蒸灭菌，每3个月一次。

3.3.2. IVC笼架使用洗笼机，高温（≥80℃）清洗，消毒仓内过氧化氢熏蒸灭菌后使用。每3个月清洗一次。

3.3.3. 笼盖、网格及垫料外包白色布袋子高压灭菌后传入房间使用，房间内储存少量，应每周更新。

3.3.4. 不适合高压和熏蒸的实验仪器设备、实验器材使用含有效氯2000 mg/L的消毒液或同等效力消毒剂进行表面擦拭，建议每次使用前。

3.3.5. 其余EP管、纸、信息牌挂牌等物料进行高压灭菌方式处理，保证灭菌效果。每周取出后重新灭菌后进入，再次使用。

3.3.6. 将小鼠从脏盒转移至新盒中时，建议使用镊子，而且最好交替使用2把。一把在用时，另一把可浸泡于含有效氯2000 mg/L的消毒液中消毒，镊子浸泡消毒的时间应不低于3 min。同一笼盒动物可使用同把镊子，但不同笼盒需更换不同镊子。消毒剂应保证当天新鲜配制，以防有机碎屑积累过多而导致消毒效果降低。

3.4 房间使用规划

4021房间10面架子800个笼位，其中约100笼为非免疫缺陷动物；裸鼠400笼；4023房间5面架子400个笼位，已用220笼。鉴于动物中心目前没有空余房间进行周转，对免疫缺陷房间笼位的使用进行按实验结束日期和动物进入日期进行使用分配，设计两个方案：

3.4.1 方案一：同一房间内新老动物不同区域分配

新动物指8月中旬之后进入的，老动物指的是8月中旬之前进入的.

统计4021房间实验9月底可以结束的约77笼，12月可以结束的动物放在#2~#6，4021房间最里面#7~#10接收8~10月新动物。10月底重新整理，并将腾空的架子推出房间用灭菌舱灭菌后重新使用。

笼盒操作：尽可能减少免疫缺陷小鼠笼盒操作，同一房间内放置了多个批次、多种品系的动物，先操作新到的裸鼠品系，再操作免疫缺陷小鼠的其他品系。

弊端：

1） 要求实验者先操作#7~10架子上新进的动物，再操作#1~6架子上老的动物，只能言行劝导、不能有效监管约束；

2） 每3个月规整房间动物布局后，学生查找自己的动物困难。

3.4.2 方案二：新老动物不同房间安排

1） 4021房间原老动物填满4023房间，余下的4021房间老动物规整集中几面架子上，并将IVC笼盒调为负压，这几面架子老动物只杀不进新；

2） 新购入的免疫缺陷小鼠放入4021房间的正压IVC架子上。房间级别4021高于4023。

3） 9月或10月底整理4021房间的老动物，将剩余老动物全部转入4023房间。

4） 待4021使用率达到70%，将4023剩余动物转入4021,4021为老动物房间，4023清空灭菌后级别高于4021，进新动物。

4. 参考文献

• 清华大学实验动物中心SOP及网站。本网站已经获得使用许可，转载。其他网站使用，请联系用户:Changzai