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{{#seo: title=超数排卵 | titlemode=article | keywords=超排,超数排卵,superovulation,hCG,eCG,hCG和eCG的区别,inhibin抗血清,inhibin抗体,,,, | description=超数排卵的步骤及影响因素}}
== 1. 定义 ==
超数排卵是给雌性供体注射外源性促性腺激素，诱发卵巢和多个卵泡的发育，并排出具有受精能力的卵子的方法，简称“超排”。

== 2. 原理 ==
通过延长卵泡刺激素（Follicle-stimulating hormone，FSH），也称促卵泡激素阈值窗突破自然周期限制，使原本闭锁的卵泡同步发育。

采用促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropin-releasing hormone agonist，GnRHa）药物抑制内源性激素分泌后，外源性促性腺激素刺激多个原始卵泡发育为成熟卵泡（即分裂活跃的细胞），

之后通过注射人绒毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotropin，hCG）等药物诱发排卵。

hCG的注射时间一定要在黄体生成素（Luteinizing Hormone，LH）峰值来临之前进行。

=== 2.1. PMSG的作用是促进卵泡生长 ===

PMSG是一种由马属动物胎盘的尿囊绒毛膜细胞分泌的糖蛋白激素，由妊娠早期母马子宫内膜杯状结构（Endometrial Cups）的滋养层所分泌，存在于怀孕母马的血清中。

PMSG具有黄体生成素（Luteinizing Hormone，LH）和FSH两种活性。其主要功能包括促进卵泡的生长和发育，以及在排卵后形成黄体。

这种激素在妊娠期间的马属动物（例如驴、斑马等）中也有类似的作用，因此也被称为马属动物绒毛膜促性腺激素（Equine Chorionic Gonadotropin，eCG）。

在兽医治疗中，PMSG常被用于治疗母畜的静止性发情、隐性发情以及久配不孕等情况。它能够促进母畜卵巢中卵泡的发育和成熟，引发发情和排卵，同时在胚胎移植过程中能够诱导超数排卵。此外，PMSG还能提高公畜的性欲，并促进精子的形成。

=== 2.2. hCG 的作用是诱发排卵 ===
hCG即人绒毛膜促性腺激素，是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。

在超数排卵过程中，HCG注射被广泛采纳和应用，以通过增加外源性的HCG，模拟生理性排卵前的LH(促黄体生成素)峰值，促进卵泡发育成熟及排卵。

== 3. 操作步骤 ==
将雌性动物先后注射PMSG（Pregnant mare serum gonadotropin）及HCG后，使动物的生殖周期及排卵时间同步化，增加排卵数量。一般比自然情况下多几倍到十几倍的卵子。

*Day1，在下午4:00 -7:00 之间对3-5周或9-12周的雌鼠注射PMSG，10 IU/只。

*Day3，在注射PMSG 47小时后，给小鼠注射同样量的HCG，10 IU/只。一般在注射HCG 16-18小时会后收集卵子，因为此时得到的卵子质量最佳。

== 4. 超排数量和质量的影响因素 ==

=== 4.1 用于超排实验的小鼠最佳年龄 ===
小鼠超排的最佳时间是3-5周龄，或者9周龄以上。

[[文件:超排_小鼠年龄_激素剂量.png|400px|thumb|center|图1 小鼠超排的最佳年龄确定、以及激素剂量的确定]]

=== 4.2 注射时间和剂量、不同动物品系对超排效果的影响 ===
从最早的文献PMSG和hCG间隔40h<ref>FOWLER RE, EDWARDS RG. Induction of superovulation and pregnancy in mature mice by gonadotrophins. J Endocrinol. 1957 Sep;15(4):374-84. doi: 10.1677/joe.0.0150374. PMID: 13475597.</ref>，47h<ref>[[H-2002-小鼠生物净化（新鲜精子IVF+胚胎移植）标准操作规程]]</ref><ref>[[H-2004-利用IVF挽救繁育困难或死亡小鼠标准操作规程]]</ref>等多种间隔时间组合。

注射剂量从1 IU/只、2.5IU/只、5 IU/只、7.5 IU/只、10 IU/只都有，选择之前应该在本设施固定技术产品品牌、之后进行各剂量测试后确定。另外也要考虑不同技术员做腹腔注射时的差距。

=== 4.3 孕酮、inhibin抗血清对超排效果的影响 ===

在近年来的研究中，使用inhibin抗血清/eCG和hCG联合使用已经成为增加胚胎数量的一种有效方法<ref>Takeo T, Nakagata N (2015) Superovulation Using the Combined Administration of Inhibin Antiserum and Equine Chorionic Gonadotropin Increases the Number of Ovulated Oocytes in C57BL/6 Female Mice. PLoS ONE 10(5): e0128330. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0128330</ref>。此外，一些研究在此基础上加入孕酮（progesterone）来进一步提高超排后卵子的数量，已经显示出潜力<ref>Kageyama A, Tsuchiya M, Terakawa J, Ito J, Kashiwazaki N. A combined treatment with progesterone, anti-inhibin serum, and equine chorionic gonadotropin improves number of ovulated oocytes in young C57BL/6J mice. J Reprod Dev. 2023 Aug 11;69(4):223-226. doi: 10.1262/jrd.2023-036. Epub 2023 Jun 17. PMID: 37331813; PMCID: PMC10435527.</ref>。

然而，现有文献中存在一个问题：使用基础试剂组合（如PMSG+hCG）进行超排时，通常能够获得大约20-25枚卵子；而加入孕酮和inhibin抗血清后，这一数字可能提高到约40枚。假如通过组合能够达到100+卵子的方法，更加确实值得进一步探索和尝试。

我们实验中心的数据显示，每只C57BL6/J（B6）超排后通常能够获得40+枚卵子。使用我们方法进行实验的实验室也以获得40枚卵子为超排实验的标准参考。

=== 4.4 外购小鼠到平台后适应性饲养时间、以及小鼠来源对超排效果的影响 ===

从图2中可以看出，超排卵子数量与适应天数无明显相关性，超排卵子数量与动物来源无明显相关性。
[[文件:超排卵子数量与适应时间 小鼠来源的关系.png|500px|thumb|center|图2 超排卵子数量与适应时间 小鼠来源的关系]]

== 5. 超排后对雌鼠的影响 ==

超数排卵对动物的生理和遗传影响正在进一步研究，包括超排卵引起的全局DNA甲基化变化和卵巢周围血管生成的改变<ref>Park SJ, Kim TS, Kim JM, Chang KT, Lee HS, Lee DS. Repeated Superovulation via PMSG/hCG Administration Induces 2-Cys Peroxiredoxins Expression and Overoxidation in the Reproductive Tracts of Female Mice. Mol Cells. 2015 Dec;38(12):1071-8. doi: 10.14348/molcells.2015.0173. Epub 2015 Oct 19. PMID: 26486164; PMCID: PMC4696998.</ref>。

尽管超排卵技术带来了卵子数量的增加，但同时也伴随着胚胎发育异常、胚胎植入失败和孕期中期死亡等问题，这些问题可能与遗传和环境因素有关<ref>BEAUMONT, H. M., & SMITH, A. F. (1975). EMBRYONIC MORTALITY DURING THE PRE- AND POST-IMPLANTATION PERIODS OF PREGNANCY IN MATURE MICE AFTER SUPEROVULATION. Reproduction, 45(3), 437-448. Retrieved Jun 27, 2025, from https://doi.org/10.1530/jrf.0.0450437</ref>
。

提示我们假如为了让雌鼠更容易怀孕，使用超数排卵的方式并不是最佳的选择。

== 参考文献 ==
<references />


[[分类:实验动物技术 胚胎操作]]