Cre:修订间差异

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== Cre重组酶的定义 ==
[[Cre重组酶]](Cyclization Recombination Enzyme, 即环化重组酶),是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶。其基因编码区序列全长1029bp,为38kDa大小的、由343个氨基酸组成的多肽单体蛋白。Cre重组酶的C-末端结构域包含催化活性位点,能够催化DNA分子中特定位点之间的重组。而且与限制酶相似,能识别特异的DNA序列,即loxP位点,使loxP位点间的基因序列被删除或重组。
[[Cre重组酶]](Cyclization Recombination Enzyme, 即环化重组酶),是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶。其基因编码区序列全长1029bp,为38kDa大小的、由343个氨基酸组成的多肽单体蛋白。Cre重组酶的C-末端结构域包含催化活性位点,能够催化DNA分子中特定位点之间的重组。而且与限制酶相似,能识别特异的DNA序列,即loxP位点,使loxP位点间的基因序列被删除或重组。
 
== LoxP序列的定义 ==
[[LoxP序列]]  locus of X (cross)-over in P1),是位于P1噬菌体中长度为34bp的一段序列,由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列共同组成,反向回文序列是Cre重组酶的识别和结合区域,间隔序列决定LoxP序列的方向。loxP有多种突变类型,多种突变类型之间不交叉识别。
[[LoxP序列]]  locus of X (cross)-over in P1),是位于P1噬菌体中长度为34bp的一段序列,由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列共同组成,反向回文序列是Cre重组酶的识别和结合区域,间隔序列决定LoxP序列的方向。loxP有多种突变类型,多种突变类型之间不交叉识别。



2024年7月5日 (五) 15:41的版本

Cre重组酶的定义

Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme, 即环化重组酶),是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶。其基因编码区序列全长1029bp,为38kDa大小的、由343个氨基酸组成的多肽单体蛋白。Cre重组酶的C-末端结构域包含催化活性位点,能够催化DNA分子中特定位点之间的重组。而且与限制酶相似,能识别特异的DNA序列,即loxP位点,使loxP位点间的基因序列被删除或重组。

LoxP序列的定义

LoxP序列 locus of X (cross)-over in P1),是位于P1噬菌体中长度为34bp的一段序列,由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列共同组成,反向回文序列是Cre重组酶的识别和结合区域,间隔序列决定LoxP序列的方向。loxP有多种突变类型,多种突变类型之间不交叉识别。

Cre-loxP系统的优点

1. 高效性

Cre重组酶与具有loxP位点的DNA片段形成复合物之后,可以提供足够的能力引发之后的DNA重组过程,重组过程简约高效;重组不受切除片段长短及位置影响,可以在活体动物体内实现,可随细胞分裂和动物传代稳定遗传。

2. 特异性强

loxP位点是一段含回文序列结构和中间有间隔的34bp元件,这种结构保证了loxP序列的唯一性,从而保证基因重组的特异性很强;在动物模型中至今未发现Loxp位点之外的非特异性重组,只在体外实验中有少量报道。

3. 应用范围广

Cre重组酶是一种比较稳定的蛋白质,可以在生物体不同的组织、不同的生理条件下发挥作用,所以说Cre-loxP系统的可应用范围非常广。

4. 快速性

动物实验已证实在受精卵分裂前的短时间内,Cre介导的特异性重组便会完成。

5. 时空特异性

如果将Cre结构基因置于某一特定启动子或其他调节基因控制之下,便会实现Cre酶蛋白在特定组织和特定时间的可控型表达,继而限定了重组发生的时空性。

①细胞类型特异启动子:aP2(脂防组织)、AQP2(肾脏集合管)、lck(胸腺细胞)、alphaA(眼晶状体)等;

②外源性化学物质调控启动子:干扰素反应Mxl启动子、他莫西酚依赖的雌激素突变体启动子。