超数排卵
1. 定义
超数排卵是给雌性供体注射外源性促性腺激素,诱发卵巢和多个卵泡的发育,并排出具有受精能力的卵子的方法,简称“超排”。
2. 原理
通过延长卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)阈值窗突破自然周期限制,使原本闭锁的卵泡同步发育。采用GnRHa(gonadotropin-releasing hormone agonists,GnRHa)药物抑制内源性激素分泌后,外源性促性腺激素刺激多个卵泡生长,最终通过hCG等药物触发排卵。
3. 操作步骤
将雌性动物先后注射PMSG(Pregnant mare serum gonadotropin)及HCG(Human chorionic gonadotropin)后,使动物的生殖周期及排卵时间同步化,增加排卵数量的过程。一般比自然情况下多几倍到十几倍的卵子。
常用于需要大量收集卵母细胞及后续的实验。假如注射HCG后和雄性动物交配,那么可以获得大量着床前胚胎用于后续的实验。
4. 超排的影响因素
4.1 超排小鼠的最佳年龄
大量文献及我们的大量工作都表明了,小鼠超排的最佳时间是3-5周龄,或者9周龄以上。
4.2 PMSG和HCG的作用
1. PMSG的目的是促进卵泡生长
孕马血清促性腺激素(PMSG)是一种由马属动物胎盘的尿囊绒毛膜细胞分泌的糖蛋白激素,由妊娠早期母马子宫内膜杯状结构(EndometrialCups)的滋养层所分泌,存在于怀孕母马的血清中。PMSG具有黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)和促卵泡素(Follicle Stimulating Hormone,FSH)两种活性。其主要功能包括促进卵泡的生长和发育,以及在排卵后形成黄体。这种激素在妊娠期间的马属动物(例如驴、斑马等)中也有类似的作用,因此也被称为马属动物绒毛膜促性腺激素(Equine Chorionic Gonadotropin,eCG)。
在兽医治疗中,PMSG常被用于治疗母畜的静止性发情、隐性发情以及久配不孕等情况。它能够促进母畜卵巢中卵泡的发育和成熟,引发发情和排卵,同时在胚胎移植过程中能够诱导超数排卵。此外,PMSG还能提高公畜的性欲,并促进精子的形成。
然而,PMSG目前只能从怀孕母马的血液中提取,且尚无替代来源。因此,为了获取更多的PMSG,一些生产者可能会采取强制让母马流产的措施,以便在第二年更快地让其怀孕。这种做法可能会对母马的健康和生命造成威胁,引起了某些国家动物福利组织的关注。
2. hCG 的目的是诱发排卵