小鼠分笼
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1. 目的
为了规范实验小鼠繁育规范,防止繁殖笼内出现多胎小仔,鼠群混乱交配,代系混乱,保障实验小鼠的福利。
2. 分笼时间及标准
2.1分笼时间
小鼠分笼又称幼鼠离乳,一般在小鼠出生后19~21 d内进行,特殊品系可根据品系特性适当提前或延迟1~2 d分笼。过早分笼会引起小鼠发育不良甚至死亡,延迟分笼可能会引响母鼠的健康和发情。
2.2分笼标准
离乳一般在幼鼠出生后19~21 d内进行,也可以根据幼鼠的生长发育情况适当调整,一般幼鼠双眼睁开、反应敏捷、具有独立采食能力即达到离乳指征,可进行离乳。按要求将相同性别的离乳幼鼠饲养在群养笼盒中。
2.3幼鼠性别判定
幼鼠性别鉴定主要从外生殖器与肛门的距离判定,近者为雌,远者为雄。
另外,雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟,而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛。
再者,幼龄雌鼠有较不明显的乳头。
表1 小鼠性别判断标准
性别判定标准
图片
观察肛门与生殖器间的距离:一般来说雄鼠的距离是雌鼠的两倍,适合于区分0~8 d的小鼠。
非白化品系雄鼠的外生殖器点:在雄鼠的生殖器下方和肛门上方有一有色的点状部位。
雌鼠的乳头,小鼠大于8 d时可以通过有无乳头进行区分,乳头只有雌鼠能显现出来,所有的品系都可以用此方法区分。黑色鼠长被毛后,乳头部位会有白色毛发显现,但是灰色的鼠越长大,乳头越难分辨。
雌鼠生殖器与肛门间有无毛线状区域,当小鼠长出被毛时,可以发现雌鼠生殖器与肛门间有一块无毛的区域,可以此区分性别。
3. 分笼操作
# 分笼前的准备工作:准备好高压灭菌好的笼盒、网隔、挂牌、笼盖、镊子、饮用水(使用自动饮水的不需准备)、笼牌和辐照或高压过的饲料。将操作台用消毒液擦拭干净待用;
# 按照小鼠生日挑出需要分笼的繁殖笼;
# 将需分笼的繁殖笼放在操作台上,取出需分笼的幼鼠,雄性幼鼠和雌性幼鼠分别放在不同的笼盒里,再放上网格、挂牌,加上水瓶 (使用自动饮水的不加水瓶)和饲料,合上笼盖,插上记录小鼠详细信息的笼牌,放回笼架上饲养,原繁殖笼的笼牌上写明分笼日期后,放回原处饲养;
# 如果分笼小鼠比较弱小,可以在新分笼的底盒内加入少量碎饲料,方便小鼠取食;
# 分笼完成后用消毒液清理、消毒操作台;
# 及时记录分笼数据,包括分笼小鼠编号、小鼠生日、基因型、父母信息、异常状态等。
4. 注意事项
# 分笼时应注意小鼠的生长发育情况。小鼠断奶后的体重约为8~9 g,如出现同龄小鼠生长状况差异较大,个头稍小的鼠可能是因为它们的母亲连续怀孕,泌乳不足造成的。分笼后只要正常饲养,个头稍小的鼠仍然能够正常生长。但是如若发现小鼠其体重形态毛色明显差于正常分笼的小鼠,有可能是某些先天性疾病(如B6的遗传性脑水肿,遗传性脱毛等),对于此类小鼠分笼时一般淘汰处理;
# 对于非常活泼的小鼠,容易在打开网隔时跳窜逃逸。因此分笼时动作要轻柔,或者刻意压低网隔防止其跳出。
# 分笼后的小鼠按照小鼠饲养密度标准规范饲养。因为小鼠是群居动物,若分笼时出现单只一笼的小鼠,则需注意它周围要有“邻居”,并在笼盒中添加玩具,减少单只饲养小鼠的孤独感,保证其生存环境相对合理以及动物福利;
# 若分笼小仔较弱,不会饮食,可在笼盒内放置少量果冻,第二天将未吃完的果冻取出,更换新的果冻,防止果冻放置过久霉变;
# 如有特殊品系待离乳小鼠弱小,可延迟1~2 d进行分笼操作;