超数排卵
1. 定义
超数排卵是给雌性供体注射外源性促性腺激素,诱发卵巢和多个卵泡的发育,并排出具有受精能力的卵子的方法,简称“超排”。
2. 原理
通过延长卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH),也称促卵泡激素阈值窗突破自然周期限制,使原本闭锁的卵泡同步发育。
采用促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin-releasing hormone agonist,GnRHa)药物抑制内源性激素分泌后,外源性促性腺激素刺激多个原始卵泡发育为成熟卵泡(即分裂活跃的细胞),
之后通过注射人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin,hCG)等药物触发排卵。
hCG的注射时间一定要在黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)峰值来临之前进行。
3. 操作步骤
将雌性动物先后注射PMSG(Pregnant mare serum gonadotropin)及HCG后,使动物的生殖周期及排卵时间同步化,增加排卵数量。一般比自然情况下多几倍到十几倍的卵子。
注射时间和剂量
常用于需要大量收集卵母细胞及后续的实验。假如注射HCG后和雄性动物交配,那么可以获得大量着床前胚胎用于后续的实验。
近年来有使用inhibin抗血清/eCG和hCG联用获得更多数量的方法出现[1]。
4. 超排的影响因素
4.1 用于超排实验的小鼠最佳年龄
小鼠超排的最佳时间是3-5周龄,或者9周龄以上。
4.2 PMSG和HCG的作用
4.2.1. PMSG的作用是促进卵泡生长
PMSG是一种由马属动物胎盘的尿囊绒毛膜细胞分泌的糖蛋白激素,由妊娠早期母马子宫内膜杯状结构(Endometrial Cups)的滋养层所分泌,存在于怀孕母马的血清中。
PMSG具有黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)和FSH两种活性。其主要功能包括促进卵泡的生长和发育,以及在排卵后形成黄体。
这种激素在妊娠期间的马属动物(例如驴、斑马等)中也有类似的作用,因此也被称为马属动物绒毛膜促性腺激素(Equine Chorionic Gonadotropin,eCG)。
在兽医治疗中,PMSG常被用于治疗母畜的静止性发情、隐性发情以及久配不孕等情况。它能够促进母畜卵巢中卵泡的发育和成熟,引发发情和排卵,同时在胚胎移植过程中能够诱导超数排卵。此外,PMSG还能提高公畜的性欲,并促进精子的形成。
4.2.2. hCG 的作用是诱发排卵
hCG即人绒毛膜促性腺激素,是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。
在超数排卵过程中,HCG注射被广泛采纳和应用,以通过增加外源性的HCG,模拟生理性排卵前的LH(促黄体生成素)峰值,促进卵泡发育成熟及排卵。
- ↑ Takeo T, Nakagata N (2015) Superovulation Using the Combined Administration of Inhibin Antiserum and Equine Chorionic Gonadotropin Increases the Number of Ovulated Oocytes in C57BL/6 Female Mice. PLoS ONE 10(5): e0128330. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0128330