超数排卵

1. 定义

超数排卵是给雌性供体注射外源性促性腺激素，诱发卵巢和多个卵泡的发育，并排出具有受精能力的卵子的方法，简称“超排”。

2. 原理

通过延长卵泡刺激素（Follicle-stimulating hormone，FSH），也称促卵泡激素阈值窗突破自然周期限制，使原本闭锁的卵泡同步发育。

采用促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropin-releasing hormone agonist，GnRHa）药物抑制内源性激素分泌后，外源性促性腺激素刺激多个原始卵泡发育为成熟卵泡（即分裂活跃的细胞），

之后通过注射人绒毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotropin，hCG）等药物诱发排卵。

hCG的注射时间一定要在黄体生成素（Luteinizing Hormone，LH）峰值来临之前进行。

2.1. PMSG的作用是促进卵泡生长

PMSG是一种由马属动物胎盘的尿囊绒毛膜细胞分泌的糖蛋白激素，由妊娠早期母马子宫内膜杯状结构（Endometrial Cups）的滋养层所分泌，存在于怀孕母马的血清中。

PMSG具有黄体生成素（Luteinizing Hormone，LH）和FSH两种活性。其主要功能包括促进卵泡的生长和发育，以及在排卵后形成黄体。

这种激素在妊娠期间的马属动物（例如驴、斑马等）中也有类似的作用，因此也被称为马属动物绒毛膜促性腺激素（Equine Chorionic Gonadotropin，eCG）。

在兽医治疗中，PMSG常被用于治疗母畜的静止性发情、隐性发情以及久配不孕等情况。它能够促进母畜卵巢中卵泡的发育和成熟，引发发情和排卵，同时在胚胎移植过程中能够诱导超数排卵。此外，PMSG还能提高公畜的性欲，并促进精子的形成。

2.2. hCG 的作用是诱发排卵

hCG即人绒毛膜促性腺激素，是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。

在超数排卵过程中，HCG注射被广泛采纳和应用，以通过增加外源性的HCG，模拟生理性排卵前的LH(促黄体生成素)峰值，促进卵泡发育成熟及排卵。

3. 操作步骤

将雌性动物先后注射PMSG（Pregnant mare serum gonadotropin）及HCG后，使动物的生殖周期及排卵时间同步化，增加排卵数量。一般比自然情况下多几倍到十几倍的卵子。

• Day1，在下午4:00 -7:00 之间对3-5周或9-12周的雌鼠注射PMSG，10 IU/只。

• Day3，在注射PMSG 47小时后，给小鼠注射同样量的HCG，10 IU/只。一般在注射HCG 16-18小时会后手机卵子，因为此时得到的卵子质量最佳。

4. 超排的影响因素及超排后对雌鼠的影响

4.1 用于超排实验的小鼠最佳年龄

小鼠超排的最佳时间是3-5周龄，或者9周龄以上。

4.3 超排后对雌鼠的影响

假如注射HCG后和雄性动物交配，那么可以获得大量着床前胚胎用于后续的实验。

超排卵对动物的生理和遗传影响正在进一步研究，包括超排卵引起的全局DNA甲基化变化和卵巢周围血管生成的改变。

随着对超排卵技术的深入理解和技术的进步，未来有望进一步优化超排卵方案，提高其在动物生殖技术和科研应用中的效果和安全性。

4.4 孕酮、inhibin抗血清对超排效果的影响

在近年来的研究中，使用inhibin抗血清/eCG和hCG联合使用已经成为增加胚胎数量的一种有效方法。此外，一些研究在此基础上加入孕酮（progesterone）来进一步提高超排后卵子的数量，已经显示出潜力。

然而，现有文献中存在一个问题：使用基础试剂组合（如PMSG+hCG）进行超排时，通常能够获得大约20-25枚卵子；而加入孕酮和inhibin抗血清后，这一数字可能提高到约40枚。对于那些能够达到100+卵子的方法，确实值得进一步探索和尝试。

我们实验中心的数据显示，每只C57BL6/J（B6）超排后通常能够获得40+枚卵子。因此，我们鼓励使用我们的方法进行实验的实验室以此40枚为超排实验的标准参考。

希望这样的调整能够更清晰地表达您的想法和实验中心的标准要求。