A-1001-小鼠、大鼠实验及自发性肿瘤大小福利伦理要求（Tumor size）

• 文件名：A-1001-小鼠、大鼠实验及自发性肿瘤大小最大直径标准要求
• 文件编号与版本号：A-1001 V2
• 文件状态：受控
• 文件类型：SOP

1. 目的

研究用动物或者因移植肿瘤、致癌剂诱发，以及繁育易感品系动物都可能形成肿瘤。肿瘤直径太大，对动物生活造成影响，违反实验动物福利要求。为维护动物福利，避免动物遭受痛苦，制定本标准要求，规定肿瘤大小最大直径要求或重量要求。

2. 适用范围

在清华大学实验动物中心开展的小鼠、大鼠肿瘤相关动物实验及IACUC审批的所有Animal Protocols。

3. 规范

研究人员涉及肿瘤发生的研究方案必须在他们的Animal Protocols中详细说明动物研究项目实验终点到达的判定标准。当动物开始出现临床疾病的症状，包括明显焦虑，烦躁不安，肿瘤溃疡、坏死，感染，垂死，极度瘦弱或无法获得食物/饮水等状况下，虽然肿瘤尺寸满足要求，但是IACUC有权要求终止实验 。

3.1 决定肿瘤大小的影响因素

应仔细考虑以下事项：

• 减轻疼痛和痛苦的方法
• 肿瘤大小，包括多个转移性和内部肿瘤
• 与肿瘤发展相关的临床症状
• 监测频率和方法
• 肿瘤负荷的潜在临床并发症
• 干预标准、人道终点和动物的整体健康状况

3.2 肿瘤模型制作要求

一只动物最多可植入两个肿瘤位点。

3.3 体外可见肿瘤的人道终点

3.3.1 单个实体肿瘤的人道终点

在任何方向上最大直径为 2.0 厘米（小鼠）和 4.0 厘米（大鼠）。肿瘤大小不得超过这些尺寸，除非 IACUC 批准基于科学依据的情况外，超过后必须实施安乐死。。

3.3.2 多发实体肿瘤的人道终点

如果存在多个肿瘤，则组合或累积负担不得超过单个肿瘤的最大允许负担（例如，将具有多个肿瘤的小鼠中每个肿瘤的最长尺寸相加，总和必须保持 ≤ 2.0 厘米），除非 IACUC 另行批准。

3.4 体内肿瘤的人道终点

3.4.1 腔体内肿瘤或转移性肿瘤的人道终点

内部肿瘤（例如颅骨内、胸腔内、口腔内、眼后或骨盆内）和转移性肿瘤可能会干扰生命功能并导致发病或死亡。

在这些研究中，肿瘤大小可能不是一个有用的指标，主要评估应该是整体健康状况。由于使用成像或生物标志物可能会在肿瘤可见或可触及之前检测到肿瘤，因此还应考虑在肿瘤不易观察到的研究中使用成像。

3.4.2 活体成像系统辅助判断肿瘤大小

可选对于体腔内的肿瘤，可以使用 3D 成像（CT、MRI、超声波等）测量体积。或者，估算体积的常用方法是公式 V = d2 x D/2，其中“d”是最短直径，“D”是最长直径。

3.5 最大直径或体积要求

3.5.1 最大直径要求

在任何方向上最大直径为 2.0 厘米（小鼠）和 4.0 厘米（大鼠）。

3.5.2 最大体积要求

如果使用体积，小鼠的人道终点（允许的最大体积）为 4,000 立方毫米，大鼠的人道终点为 32,000 立方毫米。

多个肿瘤的总体积应低于单个肿瘤的极限。在这种情况下，应在Animal Protocol中明确定义体积终点。

3.5.3 最大重量要求

当肿瘤重量超过了动物自身体重的10%。此标准相当于25 g小鼠的皮下肿瘤最大直径不能超过20 mm（体积是4000 mm3），250 g大鼠不能超过40 mm（体积是32000 mm3）。

3.6 肿瘤发生破溃处理

小鼠肿瘤发生破溃的情况如果临床表现健康正常，小于 2.0 cm 的肿瘤出现溃疡并不一定需要安乐死，但需要更频繁的监测和可能的治疗（例如抗菌软膏）。一些患有溃疡肿瘤的小鼠，特别是那些有结痂/干燥溃疡的小鼠，可以作为实验的一部分继续进行，以减少将肿瘤移植到替代动物身上的需要。

超过20 mm，并出现溃破的情况将被视为严重违反实验动物福利相关要求，动物中心经IACUC授权有权要求停止实验，安乐死实验动物。

溃疡也可能反映出对治疗的积极、抗肿瘤反应，因为反应性组织会坏死。溃疡肿瘤渗出的血液或体液可能使动物易受感染，并需​​要根据兽医的判断进行治疗或安乐死。如果预计会出现溃疡，应在Animal Protocol中说明。