D-1001-小鼠笼具更换和健康问题汇报标准操作规程

本SOP规定了小鼠笼具更换和健康问题汇报的标准操作规程。

虽然换笼看似简单，但却是动物设施管理中饲养体系建设最关键的一环。其他的技术服务都依赖于良好的饲养工作。饲养工作理应更加重视。

试想一下，若生物净化后的实验小鼠很快再次被污染，那么净化技术将失去其应有的价值。

1. 目的

为了使实验小鼠饲养观察及问题反馈流程标准化，加强动物饲养平台和动物福利与质量监测平台之间的沟通协作，制定本操作规程，以保障小鼠的健康及福利问题能得到及时有效的处置与维护。

2. 适用范围与涉及人员

本规程适用于实验动物中心所有饲养在IVC（Individual Ventilated Cages，独立通风换气笼盒）内的小鼠日常饲养观察和健康报告的相关活动，涉及人员包括上述活动中的饲养平台全体工作人员，兽医及兽医助理。

3. 规范性引用文件

以上引用文件，不注明年份的均为最新版本。

4. 内容

4.1. IVC笼具的类型

中心在用的小鼠IVC笼具包括两种类型：

不含自动饮水装置的狭长型深棕色IVC笼具，笼盒外形尺寸：403*165*175 mm（长*宽*高）
含自动饮水装置的绿色IVC笼具，笼盒外形尺寸：390*200*172 mm（长*宽*高）

两种IVC笼具均适用于无特定病原体（Specific Pathogen Free，SPF）级别小鼠饲养繁育和实验研究，能够有效避免不同笼之间送排风交叉污染，保障实验动物质量和安全，也为操作人员提供良好的饲养和动物实验环境。

4.2. 饲养笼具更换及注意事项

换笼操作流程D-1001_图 1 换笼操作流程图所示。

4.3. 涉及的工具器材

小鼠饲养活动中使用到的工具器材包括但不限于：换笼车、底盒、取鼠专用镊子、哨兵鼠脏垫料专用勺、水瓶、高温高压灭菌锅、自动灌瓶机、消毒喷壶、信息牌、笔、玩具、饲料、消毒液、灭菌反渗透纯水、垫料、灭菌卫生纸、消毒杯、自动饮水擦拭消毒毛巾、自封袋等。

4.4. 一期屏障内换笼标准操作规程

一期动物房在西北门西侧，全部使用饮水瓶，其中饲养的小鼠更换笼具时，按以下流程进行：

4.4.1. 准备灭菌后的笼盒、哨兵鼠用的空底盒、饲料、取鼠专用镊子及盛有消毒液的消毒杯、消毒喷壶、哨兵鼠脏垫料专用勺、笔、玩具、自封袋等换笼需要用到的物品，按避免交叉污染要求摆放在双层换笼车上（如D-1001_图_2_一期换笼工具标准摆放示意图所示）。

4.4.2. 消毒杯中的消毒液采用高乐氏和卫可交替使用，每周轮换一次。饲养员手部消毒喷壶固定使用高乐氏，不需要更换。消毒液的配制参照C-1009-02。

4.4.3. 取下需要换的笼盒（一次只允许取下一个笼盒），打开上盖，将上盖连同网格放到灭菌后底盒上，核对只数，记录问题后，用镊子轻轻夹着小鼠尾巴根部将其转移到灭菌后的底盒中。添加饲料（不超过饲料斗高度），盖好笼盖，挂好笼牌，将更换后的干净笼盒放回原位。

4.4.4. 使用后的镊子放入消毒杯中浸泡消毒。镊子若生锈必须除锈，防止锈迹在夹取动物时给动物造成潜在伤害。

4.4.5. 检查水瓶情况，是否存在漏水或水量过少等情况，如有异常需及时更换。

4.4.6. 如双手接触小鼠，必须使用消毒剂对手部进行消毒后，方可继续换下一笼，操作同上。

4.4.7. 一期小鼠饮水全部为灭菌反渗透纯水，在洁存室内使用自动灌瓶机灌装。水瓶灌装请参照 H-1001-01，以保障每瓶水的质量一致。

4.4.8. 水瓶每周周四集中更换1次，每个饲养间准备适量备用的饮水瓶，要求7天内使用，超过7天必须弃用。备用水在饲养间需摆放整齐，盖上水瓶筐盖子，避免交叉污染。

4.4.9. 如使用特殊饮水、饲料等的笼盒，更换时请参照C-1017、C-1018、C-1029。

4.5. 二期屏障内换笼标准操作规程

二期动物房在生物医学馆地下U4，配有自动饮水系统，部分特殊水使用饮水瓶，其中饲养的小鼠更换笼具时，按以下流程进行：

4.5.1. 准备灭菌后的笼盒、哨兵鼠用的空底盒、饲料、取鼠专用镊子及盛有消毒液的消毒杯、消毒喷壶、哨兵鼠脏垫料专用勺、自动饮水擦拭消毒毛巾、笔、玩具、自封袋等换笼需要用到的物品，按避免交叉污染要求摆放在双层换笼车上（如D-1001 图 3 二期换笼工具标准摆放示意图所示）。

4.5.2. 消毒杯中的消毒液采用高乐氏和卫可交替使用，每周轮换一次。饲养员手部消毒喷壶固定使用的高乐氏，不需要更换。消毒液的配制参照C-1009-02。

4.5.3. 先进行自动饮水嘴的消毒：一次性取下一列（从低到高依次取下，按列顺序摆放，如该列有空位，需注意记录），注意小心摆放，避免笼盒滑落倾倒。用盛装有20 ppm高乐氏消毒液的喷壶消毒水嘴后，再用拧干的方巾一一擦拭，擦拭过程中将红色密封圈转到饮水嘴前端，之后使用20 ppm的高乐氏消毒液二次消毒水嘴，注意喷壶出水口调节为水柱状，以便清洗自动饮水阀导杆内部，用于擦拭的方巾浸在装有20 ppm的高乐氏消毒液中（使用高压过的开放式小鼠笼盒盛装）。每更换一面笼架后换一块新的方巾，消毒液换新，双层车也清洁干净后再进行下一面笼架的换笼操作。在此过程中，需注意饮水阀是否有异常，如导杆处漏水，缺少延长杆等，有问题及时反馈解决。

4.5.4. 完成水嘴消毒后，按顺序对先前取下的一列笼盒进行换笼操作，一次只允许操作一盒，不允许同时操作两笼或更多笼盒。打开笼盖，将网格放到干净笼盒上，核对信息牌，记录问题后，用镊子轻轻夹着小鼠尾巴根部将其转移到灭菌后的底盒中。从换下来的脏底盒里，使用哨兵鼠勺子挖一勺垫料，放到哨兵鼠空底盒。

4.5.5. 使用后的镊子放入消毒杯中浸泡消毒。镊子若生锈必须除锈，防止锈迹在夹取动物时给动物造成潜在伤害。哨兵鼠勺子不需要放到消毒杯中，哨兵鼠空底盒需放置饲料半网格，用于放哨兵鼠专用勺子，避免手部频繁接触脏垫料。

4.5.6. 如双手接触小鼠，必须使用消毒剂对手部进行消毒后，方可继续换下一笼。换笼操作同上。

4.5.7. 最后换该面架子的哨兵鼠，每一个换下来的脏垫料底盒均需挖一勺垫料给哨兵鼠空底盒。将哨兵鼠转移到盛着各笼盒脏垫料的底盒中去，转移网格，添加饲料（不超过饲料斗高度），盖好笼盖，挂好笼牌，放回原位。一面笼架有一盒哨兵鼠。哨兵鼠固定放置在每面笼架排风口的最末端位置。

4.5.8. 二期统一使用自动饮水系统，如使用特殊饮水、饲料等的笼盒，更换时请参照C-1017、C-1018、C-1029。

4.6. 换笼时注意事项

4.6.1. 避免换笼时混淆。为避免换笼时混淆小鼠，换笼操作必须一笼一笼进行。

4.6.2. 发现小鼠实际数量和笼牌信息不符。如果小鼠实际数量和笼牌信息不符，在笼牌上注明“*月*日实几只”，并及时通过短信、电话或者邮件形式告知动物拥有者。

4.6.3. 发现小鼠死亡。发现小鼠死亡在信息牌上标注“*月*日死几只，余几只”，除此之外，一期需要在C-3003表格上记录，具体操作参照D-2007-01，并保留小鼠尸体，通知实验者及时取走；二期根据实验者要求，如需保留尸体，使用自封袋装好并标注信息后，放到指定冰箱-20℃，如不需保留，饲养员统一处理掉小鼠尸体；应主动告知实验者如对小鼠死亡原因有疑问可及时联系兽医进行动物尸体剖检，动物死亡时间越短，越有利于查找死亡原因。

4.6.4. 镊子必须除锈。镊子若生锈必须除锈，防止锈迹给动物造成潜在伤害。对于新生幼崽，消毒双手后用手将其轻轻抓放到干净笼盒内，注意动作轻柔，以免对幼崽造成意外伤害。

4.6.5. 换完笼架消毒。每更换完一面笼架，要使用消毒剂对换笼车、消毒杯、哨兵鼠勺子、双手进行喷雾和擦拭消毒。将脏笼盒转出房间，尽快转移出屏障至洗消区域，避免不同笼架之间的交叉。

4.6.6. 哨兵鼠位置固定，不可随意移动或占用。

4.6.7. ♀:♂=1:3或1:4的繁殖笼里发现有怀孕雌鼠。在雄雌比例1:3或1:4的繁殖笼里发现有怀孕雌鼠，需及时通知实验者将孕鼠进行分笼处理。

4.6.8. 逃逸小鼠的处置。

a) 换笼过程中应避免出现逃逸。对逃逸的小鼠要及时捕捉，并用消毒液喷拭至全身湿透，灭菌纸擦拭后放入笼盒。

b) 若观察时发现房间有逃逸的小鼠，捕捉到后同样做消毒处理，单独放置在笼盒内，在房间内张贴小鼠逃逸通知，48小时内无人认领的要安乐死。

4.6.9. 已用笼盒及水瓶处理已饲养过小鼠的笼盒及水瓶，无论时间长短，都不再给其他小鼠使用。

4.6.10. 换笼后记录及脏笼盒处理所有需更换的笼盒都更换完后，在工作记录上记录笼具的更换情况，将脏的笼具尽快移到洗消区，避免在屏障内长时间存放。在洗消间清除脏垫料、清洗、装填干净垫料，高温高压灭菌后传入屏障内，码放整齐备用，进入下一个换笼周期。

4.6.11. 有未分笼小仔防逃逸。由于出生10天以上的小仔比较活泼，容易跳出笼盒，换笼时注意动作轻柔，降低声音，也可以借助网格或上盖做遮掩，露出一个小缝转移小仔，防止小仔跳出笼盒逃逸。

4.7. IVC笼具更换周期

4.7.1. 一般情况下，所有饲养笼具底盒、水瓶每周更换洗消一次；网格和笼盖每3个月更换洗消一次；笼架每3个月洗消一次。具体参照C-1009-01。

4.7.2. 特殊情况，如小鼠是糖尿病疾病模型，或繁殖笼中小仔数目较多，发现笼盒内粪便较多或笼盒内明显潮湿等情况应及时更换。同时此类多饮多食或繁殖笼内小鼠数量较多的笼盒在饲养观察时需要尤为注意饮水和饲料量。

4.8. 房间饲养观察内容

工作日上午、下午结束工作前房间管理员需对饲养间进行饲养观察，周末及法定节假日安排值班人员进行饲养观察。观察内容如下，

4.8.1. 一期：饮水瓶剩余水量是否充足，笼架进排风管道是否连接正常无脱落，笼架上是否有底盒异常湿的情况，房间卫生是否整洁，更新消毒液，实验者特殊照料动物观察。

4.8.2. 二期：每个笼架上的自动饮水和笼位进排风嘴是否正常，笼架上是否有底盒异常湿的情况，笼架进排风管道和自动饮水连接正常无脱落，房间卫生是否整洁，更新消毒液，实验者特殊照料动物观察。

4.9. 小鼠健康问题汇报

饲养员在换笼时注意观察每只小鼠的健康状态，如遇紧急需要救助或异常死亡的情况，可随时电话报告给负责巡查的兽医进行处置。

这里缺少了节假日动物兽医护理保障，规定饲养员或者技术员在什么状况必须要打电话给AV获取指导，什么状况可以自行治疗动物。

4.9.1. 小鼠健康观察在打开笼盒后将小鼠换到干净笼盒的过程中进行。

4.9.2. 换笼时如果发现小鼠体表有咬伤、溃烂、结痂、脱毛、精神不振、超密度饲养等异常健康情况，需挂上"兽医照料，Health Alert "红色特殊笼牌。

4.9.3. 兽医定期会进行屏障动物健康状况巡检，房间负责人需及时告知兽医本房间内有需要照料的小鼠，以便兽医在巡检时进行查看。

4.9.4. 在兽医对健康状况异常的小鼠给出处置方案后，需要用药的饲养员配合对受伤小鼠进行给药治疗，并及时将恢复情况告知兽医。

4.9.5. 小鼠痊愈后或者淘汰处理后，房间负责人撤掉"Health Alert "红色特殊笼牌。

4.10. 人员伤害应急处置

当发生小鼠咬伤、抓伤，被笼架或利器划伤等意外伤害时，应立即停止工作，离开屏障，清洗、消毒、包扎伤口，必要时及时就医，并将受伤情况报告给主管负责人。

5. 制修订记录

5.1 制订记录

制订人：
第一版制订日期：2012年6月8日

5.2 修订记录

修订内容：
修订人：
修订日期：

6. 审核、批准和生效记录

审核人：
批准人：
批准日期：2012年6月22日
生效日期：2012年6月22日

7. 参考文献

清华大学实验动物中心SOP及网站。本网站已经获得使用许可，转载。其他网站使用，请联系用户:Changzai