E-2012-高温高压灭菌器灭菌效果检测标椎操作规程

高温高压灭菌器灭菌效果检测标准操作规程

一、检测范围

实验动物中心脉动式高温高压灭菌器，灭菌程序为121℃ 20min。

二、检测位点

灭菌器内、外侧门的四角顶点及灭菌器中心点，共计9个点

注：A、B 、C、D为洁存室一侧门的点；E、F 、G、H为洗消间一侧门的点

三、检测试剂及原理

试剂：新华牌压力蒸汽灭菌生物指示剂

原理：嗜热脂肪芽孢杆菌对热的抗性较强，利用非致病性的嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌来测定热力灭菌的效果。若灭菌器灭菌效果不合格，芽孢未被杀死，可继续在培养基中生长，培养基颜色变为黄色；若灭菌器灭菌效果合格，芽孢被杀死，培养基颜色不变仍为紫色。

四、检测方法

1. 在压力蒸汽灭菌生物指示剂表面的标签空白处，记录灭菌管理的必要事项，如编号、灭菌处理日期、操作人员等。

2. 将压力蒸汽灭菌生物指示剂置于灭菌器相应检测点，运行灭菌程序。

3. 灭菌处理后，取出压力蒸汽灭菌生物指示剂，确认标签上的化学指示剂由黄色变为黑色，放置15分钟以上冷却至室温。

4. 用夹子将冷却后的压力蒸汽灭菌生物指示剂内部的安瓿瓶夹破，使菌片充分接触培养基。

5. 确认菌片浸于培养基后，放于58℃培养箱中培养48h。

6. 另取一只同批号未灭菌的压力蒸汽灭菌生物指示剂，夹破安瓿瓶后同样条件下进行培养，作为阳性对照。

7. 确认灭菌效果后，将标签取下粘贴在记录簿上，同时对压力蒸汽灭菌生物指示剂拍照留档。

五、结果判定

1. 若培养48后，生物指示剂由紫色变化黄色，表示灭菌不合格。

2. 若培养48后，生物指示剂颜色保持紫色不变，表示灭菌合格。

3. 以上两种结果只有在对照管（培养不超过24小时）为阳性时其生物监测结果才算有效。

六、注意事项

压力蒸汽灭菌生物指示剂应储存于15℃~25℃，相对湿度为35%~60%的干燥环境中，避光（包括太阳光、荧光灯及紫外消毒灯）。